RNeasy Plant Mini Kit (50)
详细描述
从植物和真菌中纯化总RNA
- 30分钟即可获得高品质的总RNA
- 无需酚/氯仿抽提
- 无需CsCl梯度离心，无需LiCl或乙醇沉淀
- 出色的RNA回收率
- 即用型RNA适合多种下游应用
RNeasy Plant Mini Kit含QIAshredder离心柱和RNeasy离心柱，前者用于匀质化和过滤高粘度的植物或真菌的裂解物，后者使用硅胶膜技术纯化至多100 μg高品质RNA。纯化过程可在QIAcube全自动核酸纯化仪上自动化进行。该试剂盒也可配合TissueRuptor或TissueLyser体系使用，高效破碎并匀质化植物样本。
RNeasy Plant Mini实验流程。
病毒检测。
采用改进的RNeasy实验方案从被感染的苹果（1）、樱桃（2）、梨（3）和葡萄藤（4–8）的种苗、黑加仑（9, 10）的叶组织及被感染的马铃薯的休眠块茎组织（11, 12）中分离总RNA。利用单管RT-PCR扩增病毒RNA。在1.5%的琼脂糖凝胶上分析扩增产物。M：DNA Markers VI，Boehringer Mannheim。（数据由加拿大农业及农业食品部植物健康中心的D.J. MacKenzie以及加拿大悉尼Euro Nursery & Vineyard（West）Inc.的M.A. McLean提供。）
组蛋白H4的组织特异性表达。
图示的番茄组织的总RNA（7 µg）的甲醛琼脂糖凝胶和northern印迹。采用32P标记的针对番茄组蛋白H4基因的DNA探针杂交印迹。M：0.24-9.5 kb RNA分子量标准。（植物组织和组蛋白H4 cDNA克隆由德国科隆马克斯-普朗克研究所从事育种研究的K. Theres提供。）
RNeasy Plant Mini Kit适用于从各种植物和真菌样本中纯化总RNA，样本为10–100 mg的组织或100–1 x 107个细胞。离心柱的结合能力达100 µg RNA。100 mg植物组织的常规产量是25–65 µg RNA，但样本不同的发育阶段和生长条件可能导致不同的RNA产量。
| 植物 | 丝状真菌 |
|---|---|
| Anemone sp. Arabidopsis thaliana1 Begonia sp. Beta vulgaris (甜菜)2 Chlamydomonas reinhardii (单细胞藻类) Chrysanthemum Clarkia spp.3 Daucus carota (胡萝卜t)4 Diascia sp. Dendranthema sp. Euglena gracilis (单细胞藻类) Funaria hygrometrica (苔) Hordeum vulgare (大麦) Lycopersicon esculentum (西红柿)5 Malus sp. (苹果)6 Nicotiana tabacum (烟草) Oryza sativa (米) Pelargonium sp. (天竺葵) Petroselinum crispum (香菜)7 Pisum sativum (豌豆) Prunus sp. (樱桃)6 Ranunculus sp. Ribes nigrum (红醋栗) Riccia fluitans (苔) Sinapis arvensis (芥末) Solanum tuberosum (土豆)8 Spinacia oleracea (菠菜) Surfinia sp. Triticum aestivum (小麦) Vitis sp. (葡萄藤)6 Zea mays (玉米) |
Acremonium crysogenum9 Fusarium avenaceum9 |
| 样本类型 | 产量 |
|---|---|
| 拟南芥叶 | 35 µg |
| 玉米叶 | 25 µg |
| 番茄叶 | 65 µg |
| 烟草叶 | 60 µg |
纯化的植物RNA，包含病毒RNA，洗脱体积30–100 µl。多聚糖等污染物被除去，洗脱得到的RNA适用于多种下游应用。
RNeasy Plant Mini Kit提供QIAshredder离心柱用于匀质化和通过离心法过滤高粘度的植物或真菌裂解物，同时采用 RNeasy Mini离心柱对RNA进行纯化。RNeasy纯化技术整合了异硫氰酸胍裂解的严谨性和硅胶膜纯化的速度和纯度，简化了总RNA纯化技术。RNeasy试剂盒提供高品质的RNA，DNA污染达到最低水平。对微量DNA非常敏感的RNA应用，可在RNeasy操作流程中进行方便的柱上DNase处理，去除残留的DNA。
RNeasy技术纯化得到的高品质RNA适合各种下游应用，包括：
- Northern印迹、点印迹和狭缝印迹
- 终点式RT-PCR
- 定量real-time RT-PCR
- 芯片分析
- Poly A+ RNA筛选
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特点
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参数
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| Applications | PCR, qPCR, real-time RT-PCR, microarray |
| Elution volume | 30–100 µl |
| Format | Spin column |
| Main sample type | Plant samples |
| Processing | Manual |
| Purification of total RNA, miRNA, poly A+ mRNA, DNA or protein | RNA |
| Sample amount | 10–100 mg |
| Technology | Silica technology |
| Time per run or per prep | 30 minutes |
| Yield | 25–60 µg |
- Isolation of total RNA from plant tissues using the RNeasy® Plant Mini Kit; alternative procedure - (EN)
- Acetone precipitation of protein from Buffer RLT or Buffer RLT Plus lysates - (EN)
- Isolation of total RNA from woody plant tissues using the RNeasy® Plant Mini Kit - (EN)
- (JA) - RNeasy Miniプロトコールとトラブルシューティング
- (EN) - Analyzing Gene Expression and Regulation
- 遺伝子発現および発現制御の解析. - (JA)
- (EN) - Quality RNA
- (JA) - 正確な遺伝子発現解析のための高品質RNA 調製.
- RNeasy Mini Handbook - (EN)
- (EN) - RNeasy Plant Mini Kit
