Rotor-Gene SYBR Green PCR Kit (400)
详细描述
在Rotor-Gene PCR仪上使用SYBR Green I通过两步法qRT-PCR超快速进行基因表达分析
- 特异性检测低拷贝靶基因
- 精确检测广泛模板量范围内的基因
- 特制的即用型预混液，用于快速循环
- 配合QuantiTect Primer Assays使用，可保证性能
Rotor-Gene SYBR Green PCR Kit专用于Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪和其他的Rotor-Gene PCR仪，使用SYBR Green I对cDNA靶基因进行超快速、高特异性的real-time PCR和两步法RT-PCR分析。经优化的预混液与独特的Rotor-Gene PCR仪配合使用保证了qPCR良好的性能。预混液可贮存在2–8°C，方便使用。
高灵敏度、高特异性的检测。
使用10倍稀释的人白细胞cDNA（10 ng到0.1 ng）和QuantiTect Primer Assay对BCL2（CLL/2型淋巴瘤B细胞）进行real-time两步法RT-PCR。反应使用[A] Rotor-Gene SYBR® Green PCR Kit和Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪或[B]供应商AII提供的试剂盒和循环仪进行，重复三次实验。Rotor-Gene体系能够检测到较低的CT值并且有更好的重复性。熔解曲线分析只有一个单峰，表明靶向扩增的特异性。
可靠、特异性的检测，可检测低达10个拷贝。
使用10倍稀释的质粒DNA（109稀释到10个拷贝）和QuantiTect Primer Assay对PPIA（亲环素A）进行real-time PCR。反应使用Rotor-Gene SYBR® Green PCR Kit和Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪，反应重复三次。[A] Rotor-Gene体系在整个浓度范围内检测可靠且CT值重复性好。[B]熔解曲线分析表明靶向扩增的特异性。
Specific primer annealing.
Cations in the Rotor-Gene Q PCR buffer increase specific primer annealing. K+ binds to phosphate groups on double-stranded DNA, stabilizing primer annealing. NH4+ destabilizes weak hydrogen bonds between mismatched bases.
Fast primer annealing.
[A] Q-Bond in Rotor-Gene SYBR® Green PCR Master Mix increases the affinity of DNA polymerase for short single-stranded DNA, reducing primer annealing time to a few seconds. In addition, the unique buffer composition supports the melting of DNA, reducing denaturation and extension times. [B] Without Q-Bond, the primer and polymerase bind sequentially to the template, increasing primer annealing time.
Rotor-Gene SYBR Green PCR Kit特别适用于对cDNA靶基因进行基因表达分析。
QuantiTect Primer Assays与Rotor-Gene SYBR Green PCR Kit配合使用，可高灵敏度定量检测特异性PCR产物，无需经过优化。
| QIAGEN | Supplier AII | |||
| CT | 平均偏差 | CT | 平均偏差 | |
|---|---|---|---|---|
| BAX (BCL2-associated X protein) | 24.84 | 0.05 | 29.57 | 0.46 |
| BCL2 (凋亡基因) | 26.96 | 0.05 |
32.83 | 0.29 |
| MYC (原癌细胞) | 28.42 | 0.21 | 35.26 | 0.72 |
| b-Actin (管家基因) | 20.24 | 0.03 | 24.39 | 0.12 |
Rotor-Gene SYBR Green PCR Kit可在Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪上进行快速、可靠的real-time PCR定量分析，无需优化反应及循环条件。混合液中的荧光染料SYBR Green I能用于分析多种不同的靶基因而无需合成靶标特异性标签探针。预混液中浓度平衡的K+和NH4+离子组合保证了高特异性扩增，使引物退火高度特异性，获得高PCR特异性和灵敏性。使用创新的PCR辅助剂Q-Bond使循环时间降低至45分钟，达到快速分析且不降低性能。
| 组分 | 特点 | 优势 |
|---|---|---|
| HotStarTaq Plus DNA Polymerase | 在95ºC下5分钟活化 | 室温下进行qPCR反应体系构建 |
| Rotor-Gene SYBR Green PCR Buffer | 浓度平衡的K+和NH4+离子组合 | 引物特异性结合保证可靠的qPCR结果 |
| 独特的Q-Bond添加剂 | 快速的PCR运行时间可获得较快的结果和每天更多的反应次数 | |
| SYBR Green I染料 | 与双链DNA结合产生较强的荧光信号 | 高度灵敏的定量检测 |
Rotor-Gene SYBR Green PCR Master Mix无需优化反应及循环条件。只需将cDNA模板DNA与引物加入到预混液中并设置循环程序。在试剂盒使用手册中有详细说明。
对于基于real-time两步法RT-PCR的基因表达分析，Rotor-Gene SYBR Green PCR Kit、QuantiTect Reverse Transcription Kit、QuantiTect Primer Assays及Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪提供了完成的即用型解决方案。QuantiTect Reverse Transcription Kit可以在20分钟内快速合成cDNA并完全去除基因组DNA污染。QuantiTect Primer Assays为覆盖全基因组，经功效验证的预制引物对，用于检测来自人、小鼠、大鼠和其他物种的转录本。QuantiTect Primer Assays可以便利的在GeneGlobe网上订购。
Rotor-Gene SYBR Green PCR Kit适用于在Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪上对cDNA靶基因进行快速real-time定量分析。该试剂盒与Rotor-Gene 3000和Rotor-Gene 6000兼容。
可使用Rotor-Gene SYBR Green RT-PCR Kit在Rotor-Gene PCR仪上通过SYBR Green I对目标RNA进行超快速、一步法qRT-PCR基因表达分析。
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特点
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参数
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| Applications | Real-Time quantification of genomic DNA or cDNA targets |
| Description | For ultrafast quantitative real-time PCR and two-step RT-PCR using SYBR Green I on Rotor-Gene cyclers |
| Reaction type | Real-time PCR and two-step RT-PCR |
| Real-time or endpoint | Real-time |
| Sample/target type | DNA, cDNA |
| Single or multiplex | Single |
| SYBR Green I or sequence-specific probes | SYBR Green I |
| Thermal cycler | Rotor-Gene Q, Rotor-Gene 3000, Rotor-Gene 6000 |
| With or without ROX | Without ROX dye |
- (EN) - Rotor-Gene Q - Pure Detection
- (EN) - Critical factors for synthesis of cDNA for real-time PCR analysis
- Rotor-Gene® software setup for the Rotor-Gene SYBR® Green PCR Kit - (EN)
- (EN) - QuantiTect Primer Assay Handbook
- リアルタイムPCR用のcDNAを合成するための重要なファクター - (JA)
- SYBR® Green マスターミックスの重要性 - (JA)
- Rotor-Gene SYBR Green プロトコールとトラブルシューティング - (JA)
- (JA) - Rotor-Gene Q — Pure Detection
- (EN) - Rotor-Gene SYBR Green Handbook
